高壓滅菌器:FDA 關(guān)于濕熱滅菌工藝驗(yàn)證資料的要求

摘自美國 FDA 藥品評(píng)價(jià)與研究中心(CDER)與 獸藥中心(CVM)1994年11月聯(lián)合發(fā)布的《人藥和獸藥無菌工藝驗(yàn)證申報(bào)資料的工業(yè)指南》

本中文版于2009年6月由藥審中心組織翻譯并準(zhǔn)核;比利時(shí)優(yōu)時(shí)比制藥有限公司翻譯;百華協(xié)會(huì)(前北核協(xié)會(huì))審核

I.前言

A. 目的

本文旨在申報(bào)人用及獸用藥品時(shí)，為上報(bào)有關(guān)證明滅菌程序有效性的文件及資料提供指南。指南中的建議適用于申報(bào)無菌產(chǎn)品(新藥申請(qǐng)、仿制藥申請(qǐng))。當(dāng)須上報(bào)已注冊產(chǎn)品有關(guān)滅菌工藝的補(bǔ)充資料時(shí)，這些建議也適用于以前已經(jīng)批準(zhǔn)的注冊申請(qǐng)。在研制型新藥及新獸藥的申請(qǐng)中，也需要有證明無菌保證的數(shù)據(jù)及資料。

1991年10月11日在美國聯(lián)邦注冊(Federal Register)上我局曾發(fā)表過一篇題為“使用無菌工藝及最終滅菌法制備人用及獸用藥品”的規(guī)程草案(56FR51354)。本指南既不是該草案的補(bǔ)充，也不是它的取代文件。無論申報(bào)單位使用終端滅菌法還是無菌工藝來生產(chǎn)無菌產(chǎn)品，這二種情況均須上報(bào)有關(guān)工藝驗(yàn)證的資料。

B. 滅菌程序驗(yàn)證的文件

為了證明滅菌程序及其相關(guān)的監(jiān)控規(guī)程能穩(wěn)定而可靠地獲得某個(gè)無菌的產(chǎn)品，必須設(shè)計(jì)并進(jìn)行一系列的科學(xué)試驗(yàn)(包括試驗(yàn)方案和記錄)。對(duì)于某個(gè)無菌產(chǎn)品、滅菌程序有效性的評(píng)價(jià)，應(yīng)以此為基礎(chǔ)。只有通過這些試驗(yàn)及監(jiān)控獲得的數(shù)據(jù)才能判定產(chǎn)品的無菌保證水平(非無菌品概率)。根據(jù)科學(xué)的方法、有效的文件和記錄以及結(jié)果才能得出科學(xué)的結(jié)論——滅菌程序有效性已被驗(yàn)證。一個(gè)藥品，無論是用終端滅菌法還是無菌工藝，滅菌程序有效性不是通過三批的生產(chǎn)規(guī)模的數(shù)據(jù)來驗(yàn)證的。而是應(yīng)當(dāng)在確實(shí)代表生產(chǎn)中擬采用的條件和規(guī)程的條件下去獲得滅菌程序驗(yàn)證的數(shù)據(jù)。

藥物評(píng)價(jià)及研究中心對(duì)滅菌工藝驗(yàn)證的評(píng)價(jià)，系對(duì)藥品申請(qǐng)上報(bào)研究材料的科學(xué)評(píng)價(jià)。這一審查由FDA的審查官員牽頭，它是審查官員、監(jiān)督官員以及調(diào)查員為確保對(duì)人用及獸用藥品無菌工藝實(shí)施全方位控制而共同努力的一項(xiàng)成果。證明無菌保證的資料及數(shù)據(jù)可以直接列入申請(qǐng)資料中，也可作為藥品工藝檔案(DMF)、獸藥工藝檔案(VMF)特別的參考材料或其他申請(qǐng)材料，但應(yīng)包括申請(qǐng)人對(duì)引證檔案的書面批準(zhǔn)文件。

C. 說明

本指南旨在對(duì)人用及獸用藥品申請(qǐng)人在申報(bào)資料中應(yīng)包括的內(nèi)容提出建議。

以下各章節(jié)列出在各種申請(qǐng)?zhí)峤坏馁Y料和數(shù)據(jù)的法規(guī)要求：

1. 人用藥品

研制型新藥申請(qǐng)21 CFR 312.23(a)(7) 新藥申請(qǐng)21 CFR 314.50

仿制藥21 CFR 314.94和314.50

補(bǔ)充申請(qǐng)21 CFR 314.70

2. 獸藥

研制型新獸藥申請(qǐng)21 CFR Part 511

新獸藥申請(qǐng)21 CFR 514.1

新獸藥補(bǔ)充申請(qǐng)21 CFR 514.8

II. 終端濕熱滅菌程序的資料

為證明終端濕熱滅菌程序的無菌保證水平，應(yīng)上報(bào)以下資料。盡管以下簡要討論的議題是濕熱滅菌，但同類型的資料也適用于其他滅菌手段(如環(huán)氧乙烷或放射滅菌，參見本指南第Ⅲ節(jié))。在所申報(bào)藥品的生產(chǎn)中擬采用的每一設(shè)備，都應(yīng)上報(bào)以下資料：

A. 對(duì)產(chǎn)品及滅菌程序的說明

1. 藥品及容器-膠塞系統(tǒng)

對(duì)待滅菌的藥品及容器-膠塞系統(tǒng)的說明，如大小規(guī)格、灌裝體積或外包裝情況。

2. 滅菌程序

對(duì)最終容器-膠塞系統(tǒng)中的藥品的滅菌程序的描述，以及對(duì)滅菌中的傳送裝置、組件、包裝材料、原料或藥液及有關(guān)物品所采用的滅菌程序的說明。應(yīng)上報(bào)證明這些滅菌程序有效性的資料及數(shù)據(jù)(參見本指南第Ⅱ.B及Ⅱ.C節(jié))。

3. 滅菌釜(Autoclave)程序及其性能指標(biāo)

對(duì)滅菌過程的詳細(xì)說明，包括滅菌程序所屬的類別(如飽和蒸汽法、熱水浸泡法及熱水噴淋法)，程序的參數(shù)及功能指標(biāo)，包括溫度、壓力、時(shí)間、最高及最低F0值;提供生產(chǎn)中擬采用滅菌釜的資料，包括生產(chǎn)廠家及型號(hào)。

4. 滅菌釜(Autoclave)的裝載方式

應(yīng)對(duì)具有代表性的滅菌裝載方式作出說明。

滅菌周期監(jiān)控的方法和控制手段：

應(yīng)詳細(xì)說明日常生產(chǎn)中所采用的監(jiān)控手段及方法，如熱電偶、溫度指示瓶及生物指示劑，包括它們各自的數(shù)量和位置，還應(yīng)說明合格及不合格的標(biāo)準(zhǔn)。

5. 生產(chǎn)用滅菌釜(Autoclave)的再確認(rèn)

對(duì)生產(chǎn)用滅菌釜(Autoclave)常規(guī)再確認(rèn)及不定期再確認(rèn)的方案作出說明，包括頻率。

6. 再滅菌

應(yīng)對(duì)產(chǎn)品再滅菌(例如額外的熱處理)的所有方案作詳細(xì)說明，并提供驗(yàn)證總結(jié)。請(qǐng)注意，再滅菌也將影響到產(chǎn)品的穩(wěn)定性研究計(jì)劃。有關(guān)穩(wěn)定性試驗(yàn)的詳細(xì)資料可參見藥品評(píng)價(jià)及研究中心“上報(bào)人用藥品及生物制品穩(wěn)定性文件指南”及獸藥中心的“藥品穩(wěn)定性指南”。

B. 滅菌程序的熱力學(xué)確認(rèn)

1. 熱分布及熱穿透試驗(yàn)

應(yīng)提供熱分布及熱穿透試驗(yàn)方案及數(shù)據(jù)的總結(jié)，以證明生產(chǎn)中采用的滅菌程序的—致性、重現(xiàn)性并證明運(yùn)行性能達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。為確保結(jié)果穩(wěn)定而有意義，應(yīng)提供至少連續(xù)三次運(yùn)行成功的結(jié)果。

2. 熱點(diǎn)監(jiān)控器(熱電偶)

應(yīng)詳細(xì)說明所用熱點(diǎn)監(jiān)控器的數(shù)目及它們在腔室中的位置。用示意圖說明最為方便。

3. 裝載方式的熱力學(xué)影響

應(yīng)進(jìn)行最大及最小裝載的試驗(yàn)，以獲得裝載方式對(duì)產(chǎn)品熱點(diǎn)影響方面的數(shù)據(jù)。如系同—類容器，但裝量不同，則有必要進(jìn)行—些補(bǔ)充試驗(yàn)。上述情況可采用匯總數(shù)據(jù)的形式。例如，一份總結(jié)應(yīng)包括高溫及低溫范圍、在滅菌階段的平均溫度、最低及最高F0值、滅菌時(shí)間、運(yùn)行的日期和時(shí)間以及滅菌釜(Autoclave)的編號(hào)。上報(bào)的資料及數(shù)據(jù)應(yīng)使用所申報(bào)產(chǎn)品今后生產(chǎn)時(shí)采用的滅菌釜(Autoclave)運(yùn)行獲得。

4. 批記錄中應(yīng)有的資料

申請(qǐng)中的批記錄應(yīng)包括化學(xué)、生產(chǎn)及控制方面的內(nèi)容。應(yīng)說明擬用于容器-膠塞系統(tǒng)任何組件的滅菌或去熱原處理的程序，而這些程序應(yīng)是通過驗(yàn)證的程序(可采用在批記錄中注明有關(guān)驗(yàn)證方案或標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的方式)。應(yīng)提供上述有關(guān)的驗(yàn)證資料。

C. 滅菌程序的功效

應(yīng)提供證明生產(chǎn)用滅菌程序有效性(滅菌率)的驗(yàn)證資料。應(yīng)證明任何—個(gè)最終滅菌程序能達(dá)到10-6或更好的無菌保證水平。應(yīng)證明無菌藥品的各個(gè)部分，必要時(shí)包括容器及膠塞均能達(dá)到這—無菌保證水平。試驗(yàn)的類型及用于試驗(yàn)的方法與生產(chǎn)的產(chǎn)品及具體的加工工藝有關(guān)，各個(gè)生產(chǎn)廠家有其各自的做法，—般說來，應(yīng)提供下列類型的資料和數(shù)據(jù)：

1. 污染菌的特性及鑒別

應(yīng)詳細(xì)說明鑒別污染菌的方法及結(jié)果并闡明其特性。上報(bào)資料的數(shù)量及類型取決于所取的策略，如以帶菌量為基礎(chǔ)的殘存概率滅菌法比過度殺滅法需要的資料就多。需要有藥液受微生物污染方面的資料，如數(shù)量、類別、耐熱性，還包括那些與藥液、容器及膠塞有關(guān)的污染菌。有必要對(duì)耐熱性最強(qiáng)的污染菌進(jìn)行鑒別。

2. 生物負(fù)荷的控制標(biāo)準(zhǔn)

應(yīng)提供微生物污染(生物負(fù)荷)的控制標(biāo)準(zhǔn)(警告限度及采取措施的限度)。為確保不超過根據(jù)驗(yàn)證的結(jié)果所確定的標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)實(shí)施常規(guī)的污染菌監(jiān)控計(jì)劃(如檢測的頻率和方法)。申請(qǐng)中應(yīng)包括這一計(jì)劃的細(xì)節(jié)并提供具體的監(jiān)控方法。

3. 生物指示劑的鑒別、耐熱性及穩(wěn)定性

應(yīng)提供滅菌程序驗(yàn)證所用的生物指示劑有關(guān)的資料，如生物指示劑的鑒別、耐熱性(D及Z值)及穩(wěn)定性。如使用市售的生物指示劑，則有必要對(duì)孢子數(shù)及其耐熱性進(jìn)行標(biāo)定并提供相應(yīng)的數(shù)據(jù)。

4. 污染菌耐熱性與生物指示劑耐熱性的比較

有必要將污染菌的耐熱性及生物指示劑的耐熱性進(jìn)行比較。應(yīng)測定它們在產(chǎn)品中或在產(chǎn)品上(例如在產(chǎn)品藥液中、在容器及膠塞內(nèi)表面上)的耐熱性。使用孢子載體(如菌膜)時(shí)，應(yīng)測定孢子在載體上及直接接種于產(chǎn)品后的耐熱性，并將二者進(jìn)行比較。

5. 微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)

應(yīng)上報(bào)微生物驗(yàn)證的資料，以證明最短的滅菌周期在最差的條件下(如產(chǎn)品處在生物指示劑指示的最難殺滅的裝載或?qū)儆谧铍y滅菌的產(chǎn)品或二者兼?zhèn)涞那闆r)能賦予產(chǎn)品10-6的無菌保證或更好的滅菌效果。最難滅菌的產(chǎn)品或最難滅菌點(diǎn)的確定應(yīng)有科學(xué)的依據(jù)。最難滅菌點(diǎn)或最難滅菌藥液系指在模擬生產(chǎn)滅菌條件下，最難被滅菌生物指示劑的位置或藥液。

D. 環(huán)境的微生物監(jiān)控

為了確保組分、藥品容器、膠塞、半成品及成品達(dá)到適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，聯(lián)邦法規(guī)211.160節(jié)在—定程度上要求，應(yīng)設(shè)計(jì)并建立完善且適當(dāng)?shù)囊?guī)格和標(biāo)準(zhǔn)、取樣計(jì)劃及試驗(yàn)規(guī)程。因此，應(yīng)制訂生產(chǎn)區(qū)的微生物監(jiān)控計(jì)劃、產(chǎn)品的原料及工藝用水的帶菌量監(jiān)控計(jì)劃。工藝用水包括滅菌釜(Autoclave)的冷卻水。申報(bào)單位應(yīng)提供這一監(jiān)控計(jì)劃有關(guān)的資料，包括監(jiān)控的頻率、所用的方法、應(yīng)采取糾正措施的控制限度及數(shù)據(jù)匯總資料。此外，還應(yīng)提供超過標(biāo)準(zhǔn)時(shí)所采取糾正措施的詳細(xì)資料。

E. 容器-膠塞系統(tǒng)及包裝的完好性

申報(bào)單位應(yīng)提供科學(xué)的驗(yàn)證報(bào)告及數(shù)據(jù)，以便從微生物學(xué)的觀點(diǎn)來證明藥品包裝的完好性。上報(bào)的資料包括如下內(nèi)容：

1. 加工生產(chǎn)過程的模擬試驗(yàn)

試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)應(yīng)模擬滅菌程序、產(chǎn)品的處理、貯存及它們對(duì)容器-膠塞系統(tǒng)的影響。有必要進(jìn)行物理、化學(xué)及微生物學(xué)的挑戰(zhàn)性試驗(yàn)。

2. 在最苛刻條件下完好性的證據(jù)

容器-膠塞系統(tǒng)的完好性應(yīng)當(dāng)用產(chǎn)品在最苛刻滅菌條件下的數(shù)據(jù)來證實(shí)。如果產(chǎn)品擬多次滅菌，試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)中應(yīng)采用滅菌工序所有最長的周期。

3. 多腔室包裝

無菌產(chǎn)品區(qū)分隔的每一個(gè)腔室均應(yīng)分別進(jìn)行驗(yàn)證及評(píng)價(jià)。

4. 試驗(yàn)的靈敏度

應(yīng)說明并提供用于容器-膠塞系統(tǒng)完好性試驗(yàn)方法的靈敏度。

5. 在產(chǎn)品有效期內(nèi)的完好性

在產(chǎn)品有效期內(nèi)容器-膠塞系統(tǒng)抗微生物污染的完好性應(yīng)予驗(yàn)證(參見本指南第V. A節(jié))。

F. 細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)及其方法

應(yīng)詳細(xì)闡明產(chǎn)品細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)的方法，內(nèi)容包括實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)、抑制試驗(yàn)和

促進(jìn)試驗(yàn)及其結(jié)果、非抑制檢出濃度及最大有效稀釋度的測定。詳見我局“鱟試劑測試法作為藥品內(nèi)毒素檢測的驗(yàn)證指南(用于人用和獸用注射藥、生物制品以及醫(yī)療器械)。”

G. 無菌檢查的方法及判定合格的標(biāo)準(zhǔn)

應(yīng)詳細(xì)闡明無菌檢查的方法，包括生產(chǎn)過程中代表性樣品的取樣計(jì)劃。當(dāng)試驗(yàn)的方法和官方規(guī)定的方法有顯著差別時(shí)，應(yīng)提供該方法和官方規(guī)定方法等效的證據(jù)。應(yīng)對(duì)在隔離系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行的試驗(yàn)做出說明，必要時(shí)應(yīng)提供隔離系統(tǒng)驗(yàn)證的有關(guān)資料。

H. 制訂及遵循正式書面規(guī)程的證據(jù)

為防止無菌產(chǎn)品的微生物污染，聯(lián)邦法規(guī)211.113(b)要求設(shè)計(jì)、制訂并遵循各種書面的規(guī)程。這類規(guī)程應(yīng)包括任何形式的滅菌程序的驗(yàn)證。因此，應(yīng)提供制訂及遵循上述各項(xiàng)正式書面規(guī)程的證據(jù)。標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的清單或上報(bào)有關(guān)文件及記錄可作為上述各項(xiàng)證據(jù)的組成部分。

所屬關(guān)鍵詞： 滅菌 滅菌工藝